Regulação Transcricional do Promotor do Gene GLUT4 Humano em Camundongos Transgênicos Diabéticos

Reportamos anteriormente que 2400 pares de bases (pb) de DNA flanqueador 5' são suficientes para a regulação específica de tecido e hormonal/metabólica do gene GLUT4 humano em camundongos transgênicos (Liu, M.-L., Olson, A. L., Moye-Rowley, W. S., Buse, J. B., Bell, G. I., e Pessin, J. E. (1992) J. Biol. Chem. 267, 11673-11676). Para definir melhor as sequências de DNA necessárias para a expressão do GLUT4, geramos camundongos transgênicos levando 1975, 1639, 1154, 730 e 412 pb do flanco 5' do GLUT4 (hG4) fundido ao gene relatador da acetiltransferase de cloramfenicol (CAT). Os construtos 1975-hG4-CAT, 1639-hG4-CAT e 1154-hG4-CAT foram expressos de maneira específica para o tecido, idêntica ao mRNA endógeno de GLUT4 murino. A regulação desses construtos de gene relatador no diabetes sem insulina também foi paralela ao gene endógeno. Em contraste, o 730-hG4-CAT foi expresso em altos níveis apenas nos músculos esqueléticos e em baixos níveis em todos os outros tecidos examinados. Além disso, a expressão de 412-hG4-CAT foi completamente irrestrita. Nem os genes relatadores 730-hG4-CAT nem 412-hG4-CAT apresentaram qualquer regulação dependente de insulina. Esses dados demonstram que um elemento de DNA específico de músculo esquelético está localizado a menos de 730 pb do DNA flanqueador 5' do GLUT4, mas que 1154 pb são necessários para direcionar a extensão total da regulação específica de tecido e dependente de insulina do gene GLUT4 humano em camundongos transgênicos.