Validação de Marcadores de Microssatélites para Uso na Tipagem de Infecções Policonais por Plasmodium Falciparum

Os métodos de tipagem para ensaios de eficácia de fármacos contra Plasmodium falciparum não foram padronizados e podem falhar em distinguir com precisão a recrudescência de novas infecções, especialmente em áreas de alta transmissão onde infecções policonais são comuns. Desenvolvemos um método simples para tipagem usando microssatélites previamente identificados e eletroforese capilar, validamos esse método usando misturas de clones de laboratório e aplicamos o método em amostras de campo. Dois marcadores de microssatélites produziram resultados precisos para amostras de clone único, mas não para amostras policonais. Outros quatro marcadores de microssatélites foram tão sensíveis quanto e mais específicos do que técnicas de tipagem comumente utilizadas, baseadas nas proteínas de superfície de merozoítos 1 e 2. Quando aplicados a amostras de 15 pacientes em Burkina Faso com parasitemia recorrente após tratamento com sulfadoxina-pirimetamina, a adição desses quatro marcadores de microssatélites à tipagem de msp1 e msp2 resultou em uma reclassificação dos desfechos que fortaleceu a associação entre a mutação de resistência a anti-folato dhfr 59R e recrudescência (P = 0.31 versus P = 0.03). Quatro marcadores de microssatélites tiveram bom desempenho em amostras policonais e podem fornecer uma adição valiosa à tipagem para estudos clínicos de eficácia de fármacos em áreas de alta transmissão.