Determinantes Estruturais da Atividade da Glucosiltransferase da Toxina A de Clostridium difficile

Os principais fatores de virulência na patogênese de Clostridium difficile são TcdA e TcdB, glucosiltransferases homólogas capazes de inativar pequenas GTPases dentro da célula hospedeira. Apresentamos estruturas cristalinas do domínio de glucosiltransferase TcdA na presença e ausência do co-substrato UDP-glicose. Embora o núcleo enzimático seja semelhante ao de TcdB, a superfície proposta de ligação à GTPase difere significativamente. Mostramos que TcdA é comparável a TcdB em sua modificação de substratos da família Rho e que, ao contrário de TcdB, TcdA também é capaz de modificar GTPases da família Rap tanto in vitro quanto em células. As atividades de glucosiltransferase de ambas as toxinas são reduzidas no contexto do holotoxina, mas podem ser restauradas com ativação autoproteolítica e liberação do domínio de glucosiltransferase. Esses estudos destacam a importância da ativação celular na determinação da gama de substratos disponíveis para as toxinas uma vez entregues na célula.