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A diferenciação erythroide de células de eritroleucemia murina (MEL) é muito mais extensa quando as células estão aderidas a placas revestidas de fibronectina do que em cultura em suspensão. Células induzidas em cultura em suspensão por 4 dias ficam presas em um estágio final de eritroblasto e não passam por enucleação. A incubação de células em suspensão por mais de 4 dias resulta em lise. Em contraste, células induzidas por DMSO em placas revestidas de fibronectina por 7 dias diferenciam-se em células enucleantes, reticulócitos e eritrócitos. Como determinado por imunoblotting quantitativo, células induzidas em cultura em suspensão acumulam aproximadamente 33% da quantidade da principal proteína de membrana eritroide Banda 3 presente em eritrócitos, enquanto células induzidas em placas revestidas de fibronectina acumulam 80-100% da quantidade presente em eritrócitos. Tanto as células induzidas em suspensão quanto as células induzidas em placas revestidas de fibronectina acumulam aproximadamente 90% da quantidade de espectrina e anquirina presentes em eritrócitos. Como revelado por microscopia de imunofluorescência durante a enucleação de células MEL, tanto a Banda 3 quanto a anquirina são sequestradas no fragmento citoplasmático do reticulócito emergente. Células enucleadas e em estágios posteriores se descolam da matriz de fibronectina, devido à perda do receptor de fibronectina na superfície; isso imita a liberação normal de reticulócitos da matriz da medula óssea para o sangue. Assim, uma matriz de fibronectina proporciona um microambiente permissivo dentro do qual células precursoras eritroides residem, proliferam, migram e expressam seu programa normal de diferenciação.
Patel et al. (Terça-feira,) estudaram essa questão.
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