Imuno-localização do transportador de glicose regulável por insulina no tecido adiposo marrom do rato.

Anticorpos específicos para o transportador de glicose regulável por insulina (GLUT 4) foram usados para imunolocalizar esta proteína no tecido adiposo marrom de ratos tratados com insulina e em condições basais. Seções criogênicas de tecido fixo foram incubadas com anticorpos, que foram posteriormente rotulados com Proteína A/ouro e examinados por EM. Anticorpos contra albumina e catepsina D também foram usados com partículas de ouro de diferentes tamanhos para identificar endossomos precoces e tardios, respectivamente. Em condições basais, 99% da rotulagem de GLUT 4 estava localizada dentro da célula. A rotulagem ocorreu predominantemente no retículo trans-Golgi e em estruturas tubulo-vesiculares em outras partes do citoplasma. Em células estimuladas por insulina, aproximadamente 40% da rotulagem de GLUT 4 estava na superfície da célula, onde estava distribuída aleatoriamente, exceto por agrupamentos ocasionais em fossas revestidas. Além disso, após o tratamento com insulina, GLUT 4 também estava enriquecido em endossomos precoces. Concluímos que a translocação de GLUT 4 para a superfície da célula é o principal mecanismo pelo qual a insulina aumenta o transporte de glicose. Além disso, esses resultados sugerem que na presença de insulina GLUT 4 recicla da superfície celular, provavelmente pela via da fossa revestida-endossomo que foi caracterizada para receptores de superfície celular, e também que a insulina causa a redistribuição de GLUT 4 estimulando a exocitose de estruturas tubulo-vesiculares contendo GLUT 4, em vez de retardar a endocitose de GLUT 4.