A depleção de albumina do plasma humano também remove proteínas de baixa abundância, incluindo as citocinas

O uso de proteômica para análise eficiente, precisa e completa de amostras clínicas apresenta uma variedade de desafios técnicos. A presença de proteínas de alta abundância no plasma, como a albumina, pode mascarar a detecção de proteínas de baixa abundância, como as citocinas. Métodos foram propostos para depletar a amostra dessas proteínas de alta abundância para facilitar a detecção daquelas com baixa abundância. Neste estudo, um kit de depleção de albumina disponível comercialmente foi usado para determinar se a remoção da albumina reduziria significativamente a detecção de proteínas citocinas de baixa abundância no plasma humano. O Montage Albumin Deplete Kit (Millipore) foi usado para depletar albumina do sangue total estimulado por LPS de 15 doadores humanos normais. A depleção de albumina foi medida utilizando o reagente BCG e SDS-PAGE, e a recuperação de citocinas foi determinada por um microensaio imunológico que mede tanto citocinas pró-inflamatórias quanto anti-inflamatórias. A média de depleção de albumina das amostras foi de 72%. No entanto, várias citocinas também foram significativamente reduzidas quando a albumina foi removida do plasma. Além disso, houve uma redução variável na recuperação de citocinas a partir de uma mistura conhecida de citocinas em uma quantidade mínima de plasma que foi carregada nas colunas. Esses dados demonstram que pode haver uma perda não específica de citocinas após a depleção de albumina, o que pode comprometer a análise proteômica subsequente.