O componente não-tubulina dos oligômeros de proteínas de microtúbulo. Efeito na auto-associação e propriedades hidrodinâmicas.

Investigamos a associação de proteínas de microtúbulo não-tubulina com tubulina para formar as estruturas oligoméricas em forma de anel encontradas nas preparações de microtúbulo. Descobrimos que as duas espécies oligoméricas presentes em nossas preparações de proteínas de microtúbulo (s020,w = 18 e 30 S) precisam de fatores não-tubulina para sua formação. Dois tipos de proteínas não-tubulina, as proteínas de alto peso molecular (HMW) e as proteínas tau, foram encontradas ativas na formação de anéis. As proteínas HMW promoviam a formação do oligômero de 30 S, enquanto as proteínas tau promoviam a formação de um oligômero de s020,w = 20 S. A análise do oligômero de 30 S por cromatografia de filtragem em gel mostrou que a razão de proteínas HMW para tubulina era cerca do dobro da encontrada no microtúbulo. As proteínas HMW poderiam ser destruídas pela exposição à tripsina, resultando em um aumento acentuado no coeficiente de sedimentação do oligômero de 30 S para 39 S. As espécies de 20, 30 e 39 S foram identificadas como anéis por microscopia eletrônica. A identidade da estrutura de 18 S como um anel foi questionada. Nossos dados indicam que a espécie de 20 S é um único anel e que o oligômero de 30 S é um anel de duas camadas com projeções HMW que contribuem para uma resistência hidrodinâmica substancial à partícula. Comparamos a organização dos subunidades de tubulina e moléculas de HMW no anel de 30 S com a organização desses componentes no microtúbulo e sugerimos que a organização no anel é conservada no microtúbulo.