Formas oxidadas do hormônio paratireoideano com atividade biológica. Separação e caracterização das formas hormonais oxidadas na metionina 8 e metionina 18.

O hormônio paratireoideano bovino (PTH) foi oxidado com peróxido de hidrogênio, e os produtos da oxidação foram separados por cromatografia líquida de alta eficiência em fase reversa. Usando um gradiente raso, quatro picos principais (picos I-IV na ordem de eluído) foram identificados e completamente separados entre si. O pico IV coeluiu com PTH totalmente reduzido. O pico que eluía mais cedo (pico I) poderia ser reduzido com mercaptoetilamina para produzir todos os três picos que eluíam posteriormente. O segundo pico poderia ser reduzido de volta ao pico IV, mas não ao pico III, enquanto o pico III poderia ser oxidado ao pico I, mas não ao pico II. Esses dados, além da cinética da oxidação, mostraram que os picos II e III são intermediários na geração de I a partir de IV ou IV a partir de I, mas não foram gerados um a partir do outro. A análise de aminoácidos mostrou que o pico I não contém metionina e duas reservas de óxido de metionina, os picos II e III contêm um óxido de metionina cada, e o pico IV contém duas reservas de metionina e nenhum óxido. O estudo dos peptídeos produzidos a partir de cada forma de PTH pela clivagem com brometo de cianogênio mostrou que o pico II está oxidado na metionina 8 e o pico III na metionina 18, enquanto o pico I está oxidado em ambas as metioninas. A atividade biológica de cada pico foi determinada no ensaio de adenilil ciclase da membrana renal. Todas as formas eram ativas, mas com potências amplamente variáveis (pico IV maior que pico III maior que pico II maior que pico I).