A proteína X do vírus da hepatite B modula a proteína associada ao oncogene yes por CREB para promover o crescimento de células hepatoma

UNLABELLED: A proteína X do vírus da hepatite B (HBx) desempenha papéis críticos no desenvolvimento da carcinogênese hepatocelular (HCC). A proteína associada ao oncogene yes (YAP), um efetor downstream da via de sinalização Hippo, é um importante oncogene humano. No presente artigo, relatamos que o YAP está envolvido na hepatocarcinogênese mediada por HBx. Demonstramos que a expressão do YAP estava dramaticamente elevada em amostras clínicas de HCC, na linha celular HepG2.2.15 infectada pelo vírus da hepatite B (HBV) e em tecidos de câncer de fígado de camundongos transgênicos de HBx. Enquanto isso, descobrimos que a superexpressão de HBx resultou na regulação para cima do YAP nas linhas celulares de hepatoma HepG2/H7402 transfectadas com HBx, enquanto a interferência de RNA de HBx reduziu a expressão de YAP de maneira dependente da dose nas linhas celulares acima mencionadas, sugerindo que HBx regula para cima o YAP. Em seguida, investigamos o mecanismo subjacente à regulação para cima do YAP por HBx. Ensaios de gene reportador de luciferase revelaram que a região do promotor do YAP regulada por HBx estava localizada em nt -232/+115, contendo o elemento de proteína de ligação ao elemento de resposta ao monofosfato cíclico de adenosina (CREB). A imunoprecipitação de cromatina (ChIP) demonstrou que HBx era capaz de se ligar ao promotor do YAP, enquanto falhou ao trabalhar quando CREB foi silenciado. Além disso, confirmamos que HBx ativou o promotor do YAP através do CREB por meio de ensaios de mobilidade eletroforética e ensaios de gene reportador de luciferase. Surpreendentemente, descobrimos que o RNA de interferência curto de YAP foi capaz de bloquear notavelmente o crescimento melhorado de células hepatoma por HBx in vivo e in vitro. CONCLUSÃO: YAP é um gene condutor chave na hepatocarcinogênese induzida por HBx de maneira dependente do CREB. O YAP pode servir como um novo alvo na terapia de HCC associada ao HBV.