Análise de sequência de um clone cDNA que codifica a molécula de adesão celular do fígado, L-CAM.

A molécula de adesão celular do fígado (L-CAM) aparece em tecidos epiteliais não neurais e media a adesão dependente de cálcio nesses tecidos tanto no embrião quanto no adulto. Ela aparece nas superfícies celulares como uma glicosilproteína de Mr 124.000, mas é sintetizada como um precursor de Mr 135.000. Nós isolamos e determinamos a sequência de ácido nucleico de um clone cDNA (lambda L320) que codifica L-CAM de frango. A extremidade 5' deste clone possui uma estrutura de leitura aberta que se estende por 2520 pares de bases, seguida por uma região não traduzida de 850 pares de bases terminando com um sítio de poliadenilação em sua extremidade 3'. A análise da sequência da proteína de L-CAM intacto e de fragmentos da proteína obtidos por brometo de cianogênio confirmou a estrutura de leitura e indicou que a lambda L320 codifica a sequência completa de L-CAM como é expressa na superfície celular, bem como a maior parte do precursor. A sequência inclui um segmento hidrofóbico de 31 aminoácidos, apoiando nossa conclusão anterior de que L-CAM é uma proteína de membrana intrínseca. Existem cinco potenciais sítios de glicosilação de asparagina na parte extracelular da molécula e um domínio intracelular que é fosforilado in vivo. O polipeptídeo maduro de L-CAM consiste em 727 aminoácidos, com um Mr calculado de 79.900 para a proteína livre de carboidratos. A sequência de L-CAM não é homóloga a outras sequências de proteínas conhecidas, incluindo as da molécula de adesão celular neural (N-CAM) e outros membros da superfamília das imunoglobulinas, mas a molécula de L-CAM contém três segmentos contíguos (113 aminoácidos cada) que são homólogos entre si. As semelhanças entre esses segmentos sugerem que pelo menos parte da molécula de L-CAM surgiu por duplicação gênica.