Mecanismos de Ativação Transcricional da Expressão do Gene bcl-2 pelo 17β-Estradiol em Células de Câncer de Mama

A expressão do gene bcl-2 é induzida pelo 17beta-estradiol (E2) nas células de câncer de mama humano T47D e MCF-7, e o mecanismo de resposta ao E2 foi mais investigado pela análise do promotor do gene bcl-2. A região distal de -1602 a -1534 (bcl-2j) do promotor foi responsiva ao E2; no entanto, em ensaios de mobilidade em gel, o receptor de estrogênio alfa (ER(alpha)) não se ligou (32)Pbcl-2j, enquanto a proteína Sp1 formou um complexo de banda retardada. Análises adicionais demonstraram que a região a montante (-1603 a -1579) do promotor do gene bcl-2 continha dois sítios ricos em GC/GA em -1601 (5'-GGGCTGG-3') e -1588 (3'-GGAGGG-5') que se ligavam à proteína Sp1. Estudos subsequentes confirmaram que a transativação pelo E2 dependia das interações ER(alpha)/Sp1 com ambos os sítios ricos em GC, o que foi confirmado por análise de footprinting in vitro. Em contraste, uma região a jusante responsiva ao E2 de 21 pares de bases (-1578 a -1534) não se ligou à proteína Sp1 ou ER(alpha); no entanto, a análise de um padrão de ligação complexo com extratos nucleares mostrou que ATF-1 e CREB-1 se ligavam a esse motivo. Esses dados, juntamente com os resultados de estudos de transfeção transitória, demonstraram que a ativação transcricional pelo E2 da região de -1578 a -1534 do promotor do gene bcl-2 dependia da indução de cAMP e da subsequente ativação através de um elemento de resposta ao cAMP. Assim, a regulação hormonal da expressão do gene bcl-2 em células de câncer de mama envolve múltiplos elementos de potenciadores e a transativação mediada pelo E2 não requer a ligação direta do receptor de estrogênio com o DNA do promotor.