Este artigo metodológico delineia procedimentos padrão para o cultivo, purificação e quantificação in vitro de rotavírus animais e humanos.
Os rotavírus do grupo A (RVs) infectam os jovens de inúmeras espécies animais e causam gastroenterite aguda. O cultivo de RVs animais e humanos em células requer ativação proteolítica da proteína de adesão viral usando tripsina. Linhas celulares contínuas, como as células renais de macaco-rhesus, assim como células renais primárias de macaco, são rotineiramente usadas para o crescimento e caracterização dos RVs. A isolação e cultivo de RVs humanos a partir de amostras fecais clínicas é difícil e a adaptação para crescimento in vitro requer múltiplas passagens em células primárias. Após o crescimento, os estoques de RV podem ser purificados por centrifugação, se necessário, e quantificados usando ensaio de placa ou ensaio de foco de fluorescência. Esta unidade descreve procedimentos facilmente aplicáveis para o cultivo, armazenamento e quantificação de RVs.
Arnold et al. (Sun,) estudaram esta questão.