O inibidor de autofagia 3-metiladenina protege contra a disfunção da barreira endotelial na lesão pulmonar aguda

A autofagia é um processo celular conservado evolutivamente que facilita a reciclagem contínua de componentes intracelulares (organelas e proteínas) e fornece uma fonte alternativa de energia quando os nutrientes são escassos. Estudos recentes implicaram a autofagia em muitas desordens, incluindo doenças pulmonares. No entanto, o papel da autofagia na disfunção da barreira das células endoteliais (CE) e sua relevância no contexto da lesão pulmonar aguda (LPA) permanecem incertos. Aqui, fornecemos evidências de que a autofagia é um componente crítico da interrupção da barreira das CE na LPA. Usando um modelo de camundongo de inalação de lipopolissacarídeo bacteriano (LPS) aerosolizado de LPA, descobrimos que a administração do inibidor de autofagia 3-metiladenina (3-MA), seja profilática ou terapeuticamente, reduziu marcadamente o vazamento vascular pulmonar e o edema tecidual. O 3-MA também foi eficaz na redução dos níveis de mediadores pró-inflamatórios e na sequestração de neutrófilos pulmonares induzidos por LPS. Para testar a possibilidade de que a autofagia nas CE pudesse contribuir para lesão vascular pulmonar, abordamos seu papel no mecanismo de interrupção da barreira das CE. A redução de ATG5, um regulador essencial da autofagia, atenuou a interrupção da barreira das CE induzida por trombina, confirmando o envolvimento da autofagia na resposta. Da mesma forma, a exposição das células ao 3-MA, seja antes ou depois da trombina, protegeu contra a disfunção da barreira das CE ao inibir a clivagem e a perda de cadherina endotelial vascular em junções aderentes, bem como a formação de fibras de estresse de actina. O 3-MA também reverteu a interrupção da barreira das CE induzida por LPS. Juntas, essas informações implicam um papel da autofagia na lesão vascular pulmonar e revelam a utilidade protetora e terapêutica do 3-MA contra a LPA.