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Os requisitos para a transformação de fibroblastos embrionários de rato (REFs) pelos oncogenes ras e myc transfectados foram explorados. Sob condições de cultura em monolayer denso, nenhum dos oncogenes foi capaz de transformar REFs por conta própria. No entanto, a introdução de um oncogene ras juntamente com um marcador de resistência à neomicina selecionável nos REFs permitiu a eliminação das células normais não transfectadas e o crescimento de colônias de transformantes ras, 10% dos quais sobreviveram à crise e se tornaram tumorígenos. Essas células expressaram níveis superiores a 10 vezes mais altos de ras p21 do que as células tumorígenas co-transfectadas com os oncogenes ras e myc. O oncogene myc também foi incapaz de induzir a conversão tumorígena dos REFs, a menos que colônias especialmente refratárias de células portadoras de oncogenes, produzidas pelo uso de um marcador selecionável co-transfectado, fossem escolhidas e subcultivadas. A conversão tumorígena dos REFs por oncogenes transfectados únicos parece exigir condições de cultura especiais e altos níveis de expressão gênica.
Land et al. (Sun,) estudaram essa questão.
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