Liberação de adenosina e inosina durante hipoxia na medula espinhal isolada de ratos neonatais

FUNDAMENTO E OBJETIVO: Adenosina e inosina se acumulam extracelularmente durante hipoxia/isquemia no cérebro e podem atuar como neuroprotetores. Na medula espinhal, há evidências farmacológicas para aumentos na adenosina extracelular durante a hipoxia, mas não há medições diretas da liberação de purinas. Além disso, as vias de efluxo e a origem das purinas extracelulares não estão definidas. Para caracterizar o acúmulo de purinas induzido pela hipoxia, examinamos o efeito da hipoxia aguda nos níveis extracelulares de adenosina e inosina em medulas espinhais isoladas de ratos. ABORDAGEM EXPERIMENTAL: As concentrações de adenosina e inosina extracelulares foram avaliadas em uma preparação in vitro da medula espinhal isolada do rato neonatal por HPLC. RESULTADOS CHAVE: O nível extracelular de inosina era cerca de 10 vezes maior que o de adenosina. A hipoxia aguda (10 min) causou um aumento dependente da temperatura nessas duas purinas, que foi inibido por um aumento no Ca(2+) externo, mas não por vários inibidores de vias de efluxo ou enzimas metabólicas dos nucleotídeos de adenina. Inibidores da adenosina desaminase ou do transportador de nucleosídeos equilibrativos (ENT) aboliram o aumento induzido pela hipoxia na inosina, mas não na adenosina. A inibição do metabolismo glial aboliu o aumento de ambas as purinas induzido pela hipoxia, mas não pela privação de oxigênio-glicose, hipercapnia ou um inibidor de quinase de adenosina. CONCLUSÕES E IMPLICAÇÕES: Nossos dados sugerem que a hipoxia libera a adenosina a partir de fontes intracelulares. A inosina formada intracelularmente pode ser liberada através dos ENTs. Durante a hipoxia, os astrócitos parecem desempenhar um papel fundamental na liberação de purinas da medula espinhal de ratos neonatais.