Efeitos Imunossupressores Diretos da Proteína de Membrana Latente 1 Codificada pelo EBV

Em células neoplásicas de malignidades linfóides positivas para EBV, a proteína de membrana latente (LMP1) é expressa. Como nenhuma resposta imune celular adequada pode ser detectada contra a LMP1, investigamos se a LMP1 tinha um efeito direto na ativação de linfócitos T. Neste estudo, mostramos que quantidades em nanogramas de LMP1 recombinante purificada (rLMP1) suprimem fortemente a ativação de células T. Por alinhamento de sequências, duas sequências (LALLFWL e LLLLAL) no primeiro domínio transmembrana da LMP1 foram identificadas, mostrando forte homologia ao domínio imunossupressor (LDLLFL) da proteína transmembrana p15E codificada pelo retrovírus. Os efeitos de rLMP1 e peptídeos derivados da LMP1 foram testados em ensaios de proliferação de células T e citotoxicidade de células NK, e em um ensaio de liberação de IFN-gama induzido por Ag. Os peptídeos LALLFWL derivados da LMP1 mostraram forte inibição da proliferação de células T e citotoxicidade de células NK, enquanto peptídeos LALLFWL acetilados tiveram um efeito ainda mais forte. Além disso, a liberação de IFN-gama específica para Ag foi severamente inibida. Para exercer efeitos imunossupressores in vivo, a LMP1 precisa ser excretada das células. De fato, a LMP1 foi detectada no sobrenadante de linhas celulares B positivas para EBV (LCL), e a centrifugação diferencial em combinação com análise de Western blot dos pellets indicou que a LMP1 é provavelmente secretada por LCL na forma de exossomos. A quantidade de LMP1 secretada em culturas de células B está bem abaixo do nível imunossupressor observado com rLMP1. Nossos resultados demonstram propriedades imunossupressoras diretas da LMP1 (fragmentos) e sugerem que células tumorais positivas para EBV podem secretar ativamente a LMP1 e, assim, mediar efeitos imunossupressores em linfócitos infiltrantes tumorais. Além disso, demonstramos, pela primeira vez, que a imunossupressão mediada por proteína transmembrana não é restrita apenas a vírus tumorais de RNA, mas também pode ser encontrada em vírus tumorais de DNA.