Biossíntese de triptofano em Saccharomyces cerevisiae: controle do fluxo pelo caminho

A desrepresão enzimática e a inibição por retroalimentação da primeira enzima são os mecanismos regulatórios demonstrados para a via do triptofano em Saccharomyces cerevisiae. As contribuições relativas dos dois mecanismos para o controle do fluxo pela via in vivo foram analisadas por (i) medir a inibição por retroalimentação da sintetase de antranilato in vivo, (ii) determinar o efeito de mutações regulatórias sobre o nível do pool de triptofano e o fluxo pela via, e (iii) variar a dose gênica de enzimas individuais da via em nível tetraploide. Concluímos que o fluxo pela via é ajustado à taxa de síntese de proteínas por meio da inibição por retroalimentação da primeira enzima pelo produto final, triptofano. A síntese das enzimas do triptofano não pôde ser reprimida abaixo de um nível basal pela suplementação de triptofano nos meios. As enzimas estão presentes em excesso. Aumentar ou diminuir a concentração de enzimas individuais não teve influência perceptível no fluxo geral para o triptofano. A capacidade não inibida da via pôde ser observada tanto ao aliviar a inibição por retroalimentação pela limitação de triptofano quanto em mutantes insensíveis à retroalimentação. Ela superou a taxa de consumo do aminoácido em meio mínimo por um fator de três. A limitação de triptofano causou desrepresão de quatro das cinco enzimas do triptofano e, como consequência, levou a um aumento adicional na capacidade da via. No entanto, devido à grande capacidade de reserva da via "reprimida", a limitação de triptofano não pôde ser imposta em células tipo selvagem sem recorrer ao uso de análogos. Nossos resultados, portanto, sugerem que a desrepresão não serve como um instrumento para a regulação específica do fluxo pela via do triptofano.