O recrutamento da proteína de ligação ao CREB é suficiente para a ativação gênica mediada por CREB

A fosforilação do fator de transcrição CREB leva ao recrutamento do coativador, proteína de ligação ao CREB (CBP). Estudos recentes sugeriram que o recrutamento de CBP não é suficiente para a função de CREB, no entanto. Identificamos um motivo de interação proteína-proteína conservado dentro dos domínios de ligação ao CBP de CREB e outro fator de transcrição, SREBP (proteína de ligação ao elemento responsivo ao esterol). Em contraste com CREB, o SREBP interage com o CBP na ausência de fosforilação. Aproveitamos a conservação desse motivo de interação para testar se o recrutamento de CBP para CREB é suficiente para a ativação transcricional. A substituição de seis aminoácidos não conservados do SREBP no domínio de ativação de CREB confere uma ligação de alta afinidade ao CBP, independente de fosforilação. A molécula de CREB mutante, CREB(DIEDML), ativa a transcrição em células F9 de teratocarcinoma e PC12 mesmo na ausência de proteína quinase A (PKA). A adição de CBP exógeno aumenta o nível de transcrição mediada por CREB(DIEDML), e o adenovírus 12S E1A bloqueia a transcrição, implicando o CBP no processo de ativação. Assim, o recrutamento de CBP para CREB é suficiente para ativação transcricional. A adição de PKA estimula ainda mais a transcrição induzida por CREB(DIEDML), sugerindo que um evento de fosforilação a jusante do recrutamento de CBP aumenta a sinalização de CREB.