Análise da expressão de genes de resistência a antibióticos em Pseudomonas aeruginosa por PCR em tempo real quantitativo

Em Pseudomonas aeruginosa, muitos dos mecanismos de resistência clinicamente relevantes resultam de mudanças na expressão gênica, como exemplificado pelas bombas de efluxo de drogas Mex, pela beta-lactamase AmpC e pela porina específica de carbapenem OprD. Usamos PCR em tempo real quantitativo para analisar a expressão desses genes em cepas laboratoriais e clínicas suscetíveis e resistentes a antibióticos. Em mutantes nalB, que superexpressam OprM, observamos um aumento de quatro a oito vezes na expressão dos genes mexA, mexB e oprM. Os genes mexX e mexY foram induzidos de oito a 12 vezes na presença de 2 mg L(-1) de tetraciclina. Os níveis de expressão dos genes mexC/oprJ e mexE/oprN aumentaram de 30 a 250 vezes e de 100 a 760 vezes nos mutantes nfxB e nfxC, respectivamente. Além disso, encontramos que, em cepas laboratoriais definidas, os níveis de expressão dos genes ampC e oprD estavam paralelos à atividade da beta-lactamase e aos níveis da proteína OprD, respectivamente. Nossos dados apoiam o uso da reação em cadeia da PCR em tempo real quantitativa para a análise da expressão gênica de resistência antimicrobiana em P. aeruginosa.