Efeitos da Dimerização na Estrutura e Atividade Biológica do Peptídeo Antimicrobiano Ctx-Ha

RESUMO É bem conhecido que peptídeos antimicrobianos catiônicos (cAMPs) são agentes microbicidas potenciais para o crescente problema da resistência antimicrobiana. No entanto, as propriedades físico-químicas de cada peptídeo precisam ser otimizadas para uso clínico. Para avaliar os efeitos da dimerização na estrutura e atividade biológica do peptídeo antimicrobiano Ctx-Ha, sintetizamos as formas monoméricas e três dimericas (ramificadas em Lisina) do peptídeo Ctx-Ha por meio de síntese em fase sólida utilizando uma combinação de 9-fluorenilmetiloxicarbonila (Fmoc) e t-butoicocarbonila (Boc). O ensaio de atividade antimicrobiana mostrou que a dimerização diminui a capacidade do peptídeo de inibir o crescimento de bactérias ou fungos; no entanto, os análogos diméricos apresentaram um nível mais alto de atividade bactericida. Além disso, um aumento dramático (50 vezes) na atividade hemolítica foi alcançado com esses análogos. Estudos de permeabilização mostraram que a taxa de liberação de carboxifluoresceína foi maior para os peptídeos diméricos do que para o peptídeo monomérico, especialmente em vesículas que continham esfingomielina. Apesar das diferentes atividades biológicas, a estrutura secundária e o diâmetro do poro não foram significativamente alterados pela dimerização. Em contraste com o caso de outros cAMPs diméricos, mostramos que a dimerização diminui seletivamente a atividade antimicrobiana deste peptídeo e aumenta a atividade hemolítica. Os resultados também mostram que a interação entre peptídeos diméricos e a parede celular pode ser responsável pela diminuição da atividade antimicrobiana desses peptídeos.