O Zinco Modula a Interação da Proteína C e da Proteína C Ativada com o Receptor de Proteína C das Células Endoteliais

O zinco é um elemento traço essencial para a nutrição humana e é crítico para a estrutura, estabilidade e função de muitas proteínas. Os íons de zinco mostraram aumentar a ativação da via intrínseca de coagulação, mas regular negativamente a via extrínseca de coagulação. A via da proteína C desempenha um papel chave na coagulação sanguínea e na inflamação. Até o presente momento, não há informações sobre se o zinco modula a via da proteína C. No presente estudo, encontramos que o Zn2+ aumentou a ligação da proteína C/proteína C ativada (APC) ao receptor de proteína C das células endoteliais (EPCR) nas células endoteliais. A cinética de ligação revelou que o Zn2+ aumentou as afinidades de ligação da proteína C/APC ao EPCR. A diálise de equilíbrio com 65Zn2+ revelou que o Zn2+ se ligou ao domínio Gla, bem como a locais fora do domínio Gla da proteína C/APC. Medições de fluorescência intrínseca sugeriram que a ligação do Zn2+ induz mudanças conformacionais na proteína C/APC. A ligação do Zn2+ à APC inibiu a atividade amidolítica da APC, mas a inibição foi revertida pelo Ca2+. O Zn2+ aumentou a taxa de geração de APC nas células endoteliais na presença de concentrações fisiológicas de Ca2+, mas não aumentou ainda mais a geração de APC obtida na presença de concentrações fisiológicas de Mg2+ com Ca2+. O Zn2+ não teve efeito na atividade anticoagulante da APC. O Zn2+ aumentou a ativação mediada por APC do receptor ativado por protease 1 e p44/42 MAPK. No geral, nossos dados mostram que o Zn2+ se liga à proteína C/APC, resultando em mudanças conformacionais na proteína C/APC que favorecem sua ligação ao EPCR.