PSwitch, um sistema para controle espacial e temporal da expressão gênica em Drosophila melanogaster

Desenvolvemos um método para ativar e desativar a expressão de transgenes em Drosophila tanto no tempo quanto no espaço. Dois elementos detectores de enhancer diferentes, contendo uma forma induzível por RU486 do fator de transcrição GAL4 de levedura, foram construídos e utilizados para gerar linhagens detectoras de enhancer. Essas linhagens foram triadas quanto à expressão gênica repórter induzível por RU486 na cabeça adulta. Identificamos linhagens que exibem expressão induzível em diversos tipos celulares e teciduais, confirmando que os elementos respondem a enhancers próximos. Nenhuma expressão foi detectada na ausência do ligante. O elemento PSwitch1 respondeu a enhancers genômicos de maneira menos eficiente do que o PSwitch2, mas produziu padrões de expressão mais específicos. Duas linhagens PSwitch foram utilizadas para realizar a ablação do tecido do corpo gorduroso em fêmeas adultas por meio da expressão induzida da toxina diftérica. Essas fêmeas eram estéreis, o que se correlaciona com a perda do corpo gorduroso, e morreram prematuramente.