O fator de crescimento transformador β diminui a taxa de proliferação de células musculares lisas vasculares de rato, prolongando a fase G2 do ciclo celular e atrasando o aumento de AMP cíclico antes da entrada na fase M

O fator de crescimento transformador beta 1 (TGF-beta 1) diminuiu a taxa de proliferação de células musculares lisas vasculares aórticas de rato (VSMCs) estimuladas com soro, apresentando um efeito máximo em > 5 ng/ml (200 pM). No entanto, não reduziu a proporção de células que passaram pela fase S (> 90%) e a entrada na fase S foi atrasada em menos de 3 h. A proporção de células passando pela fase M (> 90%) também não foi afetada, mas a entrada na mitose foi atrasada em aproximadamente 24 h. Este aumento no tempo do ciclo celular foi, portanto, devido principalmente a um aumento no período G2 até a metáfase mitótica. A adição de TGF-beta 1 tardiamente em G1 ou tardiamente na fase S não conseguiu atrasar o início da mitose, mas a presença de TGF-beta 1 entre 0 e 12 h após a adição de soro em células quiescentes foi suficiente para causar o atraso máximo na mitose de aproximadamente 24 h. O papel do AMP cíclico no mecanismo dos efeitos do TGF-beta 1 no ciclo celular foi examinado. A entrada na mitose foi precedida por um aumento transitório de 2 vezes na concentração de AMP cíclico e o TGF-beta 1 atrasou tanto esse aumento de AMP cíclico quanto a entrada na mitose na mesma medida. A adição de forcolina ou 8-(4-clorofeniltiol)-AMP cíclico às células 30 h após a estimulação com soro reverteu completamente o aumento na duração da fase G2 na presença de TGF-beta 1, sugerindo que a elevação nos níveis de AMP cíclico que precede a mitose pode desencadear a entrada das VSMCs na fase M. A adição de forcolina tardiamente na fase S (26 h após a estimulação com soro) antecipou a entrada das células na fase M e elas se dividiram prematuramente. Este efeito não foi afetado pela adição de cicloheximida com a forcolina; no entanto, o efeito da forcolina na divisão celular foi completamente inibido quando a cicloheximida foi adicionada tardiamente em G1. O TGF-beta 1 impediu a perda da cadeia pesada de miosina específica de músculo liso (SM-MHC), que ocorre em culturas primárias de VSMC na presença ou ausência de soro, e as células proliferaram mantendo um fenótipo diferenciado. No entanto, o TGF-beta 1 não causou a re-diferenciação de VSMCs submetidas a subcultivo que continham quantidades muito baixas de SM-MHC e o efeito do TGF-beta 1 em prolongar a fase G2 do ciclo celular é exercido independentemente de seu efeito na diferenciação.