Localização no cérebro de mamíferos do G-substrato, um substrato específico para a quinase de proteína dependente de guanosina 3',5'-monofosfato cíclico

A distribuição regional e celular do G-substrato, uma proteína substrato de 23.000 daltons específica para a quinase de proteína dependente de guanosina 3',5'-monofosfato cíclico, foi examinada no cérebro de mamíferos utilizando técnicas de imunoprecipitação, radioimunoensaio e mapeamento de peptídeos. No cérebro de coelho, o G-substrato foi encontrado altamente concentrado no cerebelo. A concentração de G-substrato no citosol cerebelar foi de 27,2 pmol/mg. As concentrações de G-substrato no córtex, hipocampo e caudado foram apenas de 1 a 2% da encontrada no cerebelo. Estudos com camundongos mutantes neurológicos, ausentes de células de Purkinje (PCD e nervoso) ou células granulares (weaver), sugeriram que, dentro do cerebelo, o G-substrato está localizado quase exclusivamente nas células de Purkinje. Um fosfoproteína presente em regiões do cérebro não cerebelar, que co-migrou com o G-substrato em eletroforese em gel de poliacrilamida com lauril sulfato de sódio, foi demonstrada por mapeamento de peptídeos como consistindo predominantemente de inibidor de fosfatase-1. O inibidor de fosfatase-1, um potente inibidor da fosfatase de proteína-1, é conhecido por compartilhar várias propriedades físico-químicas com o G-substrato. Em contraste com os resultados obtidos com o G-substrato, a concentração de inibidor de fosfatase-1 foi significativamente menor no cerebelo do que em outras regiões principais do cérebro. Esses e outros dados sugerem que o G-substrato pode ser um inibidor de fosfatase de proteína específico para células de Purkinje.