A Ativação e Função das Metaloproteinases de Matriz do Hospedeiro na Degradação da Matriz de Dentina em Lesões de Cárie

As metaloproteinases de matriz (MMPs) são uma família de enzimas que, em conjunto, são capazes de degradar colágeno. Investigamos se as MMPs humanas poderiam participar da degradação da matriz orgânica da dentina após desmineralização. Realizamos análises por Western blot utilizando anticorpos específicos para MMPs para identificar MMPs em lesões de cárie dental humana. Foram utilizados ensaios de enzimografia e atividade funcional, com gelatina marcada com 125I como substrato ou quantificando a degradação do colágeno tipo I, para determinar a atividade de enzimas gelatinosas purificadas e salivares (MMP-2 e MMP-9) e colagenolíticas (MMP-8) com e sem ativação ácida em pHs relevantes para cárie. Análises respectivas foram realizadas com bactérias relacionadas à cárie. Realizamos análises por microscopia eletrônica para avaliar a atividade degradativa das MMPs salivares do hospedeiro esterilizadas sobre dentina humana desmineralizada. MMP-2, MMP-8 e MMP-9 humanas foram identificadas em lesões dentinárias desmineralizadas. As formas purificadas latentes dessas enzimas foram ativadas em pH baixo (4.5), seguidas de neutralização, imitando as condições durante a progressão da cárie. A incubação da saliva humana em pH baixo seguida de neutralização resultou em um aumento quatro vezes maior na atividade gelatinolítica. Nenhuma atividade gelatino ou colagenolítica foi observada em amostras bacterianas. As enzimas ativadas na saliva degradaram a matriz orgânica da dentina desmineralizada in vitro. Esses resultados demonstram o mecanismo de ativação dependente de pH das MMPs, que podem ter um papel distinto em diferentes condições fisiológicas e patológicas. Eles demonstram ainda que as MMPs do hospedeiro, ativadas por ácidos bacterianos, têm um papel crucial na destruição da dentina pela cárie.