Identificação de anticorpo monoclonal de uma proteína de membrana de 100 kDa em células HeLa e na medula espinhal humana envolvida na adesão do poliovírus.

Os locais receptores únicos para o poliovírus são considerados o principal determinante da especificidade do tipo celular e tecidual do vírus. Para estudar a interação poliovírus-célula, oito anticorpos monoclonais que bloqueiam especificamente os efeitos citopáticos do poliovírus foram gerados utilizando preparações de células HeLa como imunógeno e um novo ensaio de triagem colorimétrica. Ensaios de inibição de placas confirmaram a especificidade viral dos anticorpos, e quando um anticorpo, AF3, foi usado como sonda em imunoblotting de preparações de membrana celular, ele detectou uma banda de 100 kDa apenas nas linhas celulares e tecidos permissivos para a infecção pelo poliovírus. AF3 também inibiu especificamente a ligação do poliovírus radiomarcado às células. Em termos de especificidade tecidual, AF3 detectou a banda de 100 kDa em preparações de membrana da medula espinhal humana, mas não em homogeneizados de rim humano ou em tecido murino, incluindo o sistema nervoso central. Além disso, AF3 detectou a banda em uma linhagem celular híbrida humano-murina contendo o cromossomo humano 19, que confere permissividade para a infecção pelo poliovírus, mas o anticorpo não detectou a banda em um subclonal deficiente em cromossomo humano 19. Em um estudo imunohistoquímico do tronco encefálico humano, AF3 coloriu neurônios na formação reticular e grupos de neurônios do tronco encefálico, consistente com o padrão de dano conhecido causado pela infecção por poliovírus no tronco encefálico. Além disso, AF3 reagiu com células mononucleares periféricas humanas, consistente com a replicação conhecida do poliovírus em placas de Peyer e amígdalas. Esses resultados sugerem fortemente que a banda de 100 kDa detectada pelo anticorpo AF3 é, ou está intimamente associada, ao local receptor do poliovírus.