Glicoproteína Ib, fator de von Willebrand e glicoproteína IIb:IIIa estão todos envolvidos na adesão plaquetária ao fibrinogênio em sangue total em fluxo

Investigamos a base molecular da formação de trombos ao medir a extensão da deposição de plaquetas de sangue total em fluxo sobre lâminas de vidro revestidas com fibrina sob condições de cisalhamento bem definidas em uma câmara de perfusão retangular. As plaquetas aderiram de forma específica e prontamente a lâminas revestidas com fibrina em experimentos de perfusão de 5 minutos feitos com taxas de cisalhamento baixas (300 s-1) ou altas (1.300 s-1). O exame de microscopia eletrônica de varredura de lâminas revestidas com fibrina após as perfusões mostrou cobertura superficial por uma monocamada de plaquetas aderentes, parcialmente espalhadas. A adesão das plaquetas à fibrina foi efetivamente inibida por um anticorpo monoclonal (MoAb) específico para glicoproteína (GP) IIb:IIIa. A curva de dose-resposta para inibição da adesão pelo anti-GPIIb:IIIa em ambas as taxas de cisalhamento foi paralela àquela para inibição da agregação plaquetária. A agregação e a adesão das plaquetas à fibrina também foram bloqueadas por baixas concentrações de prostaciclina. Em contraste, o anti-GPIb reduziu a adesão em 40% a 300 s-1 e em 70% a 1.300 s-1. Um padrão semelhante de inibição incompleta dependente da taxa de cisalhamento resultou com um MoAb específico para a região de reconhecimento de GPIb do fator de von Willebrand (vWF). Plaquetas de um indivíduo com doença de von Willebrand severa, cujos plasma e plaquetas continham essencialmente nenhum vWF, exibiram adesão defeituosa à fibrina, especialmente na taxa de cisalhamento mais alta. A adição de vWF purificado restaurou a adesão a valores normais. Esses resultados são consistentes com um modelo de dois sites para a adesão das plaquetas à fibrina, no qual o complexo GPIIb:IIIa é o receptor primário, com GPIb:vWF fornecendo um caminho secundário de adesão que é especialmente importante em altas taxas de cisalhamento.