Controle da localização de uma proteína de checkpoint do fuso, Mad2, em levedura de fissão

Para garantir a segregação precisa dos cromossomos, o checkpoint do fuso atrasa o início da separação das cromátides irmãs quando o fuso não está ligado a um cinetócoro. Mad2, um componente do checkpoint, tem como alvo a Slp1 da levedura de fissão/levedura de brotamento Cdc20/humano p55CDC e impede que promova a proteólise, que é um pré-requisito para a separação das cromátides irmãs. A proteína é localizada em cinetócoros não ligados em eucariotos superiores, e pensa-se que seja necessária para a ativação do checkpoint também. Neste estudo, Mad2 e seu alvo Slp1 foram visualizados em um organismo manejável, a levedura de fissão Schizosaccharomyces pombe. Quando as células foram interrompidas em um estágio semelhante à prometáfase, o complexo Mad2-Slp1 era estável e as duas proteínas estavam colocalizadas nos cinetócoros não ligados. Quando a ligação do fuso foi completada, o complexo não era mais detectável e apenas Mad2 foi encontrado associado ao fuso. Esses resultados sugeririam que cinetócoros não ligados fornecem locais para a montagem do complexo Mad2-Slp1. Durante a interfase, Mad2 estava localizado na periferia nuclear, bem como no domínio da cromatina. Essa localização foi abolida em uma linhagem de levedura que falta Mad1, uma proteína que interage fisicamente com Mad2. Mad1 pode ancorar Mad2 na membrana nuclear e regular sua entrada no núcleo.