Das porzine reproduktive und respiratorische Syndromvirus (PRRSV) ist ein bedeutender Erreger und stellt eine ernsthafte Bedrohung für die globale Schweineindustrie dar. In dieser Studie wurde eine BAC-basierte Plattform für Rückwärtsgenetik etabliert, die einen hochpathogenen PRRSV (HP-PRRSV)-Stamm verwendete. Drei rekombinante Reporterviren wurden konstruiert, indem das Gen für das verbesserte grüne fluoreszierende Protein (EGFP) in drei verschiedene intergenische Regionen des vollständigen PRRSV-L251-Genoms eingefügt wurde. Immunfluoreszenz-Assays, kombiniert mit viralen Wachstums-kinetiken und Bewertungen der Stabilität des Reporterogens, zeigten, dass rL251-ORF4-5a-EGFP während der seriellen Passage eine relativ stabile Expression aufrechterhielt und die viralen Titer 72 Stunden nach Infektion (hpi) mit dem Eltervirus vergleichbar waren. Anschließend identifizierten wir vier Kandidatenverbindungen mit potenzieller aktivitäts gegen PRRSV unter Verwendung von rPRRSV-L251-ORF4-5a-EGFP, was darauf hinweist, dass diese Plattform als visuelles Bewertungsinstrument für das Screening von antiviralen Medikamenten verwendet werden kann. Diese Studie zeigte, dass der ORF4-5a-Intervallbereich ein machbarer und vielversprechender Ort für die Insertion exogener Gene ist und eine robuste technische Plattform für die Entwicklung von PRRSV-Impfstoffen und zur Erforschung der Pathogenese liefert.
Liu et al. (Tue,) untersuchten diese Frage.