Atypische vaskuläre Entzündung bei retinalen Vasculopathien: Zielgerichtete p38-Signalgebung

Abstract-ID 131617 Poster Board 171 Die mitogen-aktivierte Proteinkinase (MAPK) p38 spielt eine zentrale Rolle bei retinalen Erkrankungen, aber Breitspektrum-p38-Therapeutika behindern oft die physiologische Signalgebung. Atypisches p38, das ausschließlich als Reaktion auf Krankheitssignale aktiviert wird, zeigt sich als potentielles therapeutisches Ziel. Ziel dieses Projekts ist es, die atypische p38-Signalgebung zu modellieren und selektiv anzusprechen, um einen komplementären Ansatz zu Anti-VEGF-Therapien für retinalen Erkrankungen zu bieten. Mithilfe eines C57BL6-Mäusemodells für sauerstoffinduzierte Retinopathie (OIR) verglichen wir Wildtyp (WT)-Mäuse mit einer mutierten Tab1KI-Maus, die defekt in der atypischen p38-Aktivierung ist. Die postnatalen Mäuse am 7. Tag (p7) wurden fünf Tage lang 75% Sauerstoff ausgesetzt, gefolgt von fünf Tagen in Raumluft, bevor die Netzhaut entnommen wurde. Zu den Bewertungsmethoden gehörten flache Montierungen, Isolectin B4-Markierung, Immunhistochemie für Mikroglia und neurale Zellen sowie RNAseq-Analyse. Die Mäuse in Raumluft wurden an p7, p12 und p21 zur Vergleichserhebung entnommen. Wir untersuchten auch menschliche retinal endothelial Zellen (HREC) auf atypische p38-Signalgebung durch Immunblotting nach Stimulation mit bekannten atypischen p38-Aktivatoren, einschließlich Prostaglandin E2 (PGE2) und Histamin +/- p38-Kinase-Inhibitoren. Bei p17 wiesen WT-Mäuse eine Vasoobliteration und hyperproliferative Reaktionen auf, einschließlich übermäßigen vaskulären Wachstums, Tufterbildung und Ödem. Tab1KI-Mäuse zeigten eine signifikant reduzierte Vasoobliteration (5% gegenüber ca. 15% bei WT) und verringerte vaskuläre Tufterbildung (5% gegenüber 10% bei WT). Die Immunhistochemie offenbarte Veränderungen in der Mikrogliaaktivität in der Tab1KI OIR-Netzhaut. Eine bioinformatische Analyse dieser retinalen Gewebe ist im Gange, um die identifizierten morphologischen Phänotypen zu unterstützen und über 1500 unterschiedlich aktivierte Gene in Tab1KI nach OIR zu identifizieren. Zur Unterstützung des Mausmodells hielt die atypische p38-Signalgebung in HREC nach PGE2- und Histaminstimulation an und induzierte die Expression proinflammatorischer Zytokine. Unsere Daten zeigen eine ungestörte retinale vaskuläre Entwicklung in Tab1KI-Mäusen, mit signifikantem Schutz vor vaskulären Schäden bei OIR. Die Hemmung der atypischen p38 blockiert proinflammatorische Reaktionen sowohl in Maus- als auch in Menschproben. Der räumlich verzerrte Verlust der atypischen p38-Signalgebung reduziert proinflammatorische und proangiogene Signalgebung. Diese Ergebnisse unterstützen die Entwicklung selektiver Therapeutika, die auf atypische p38 bei retinalen Gefäßerkrankungen abzielen, einschließlich diabetischer Retinopathie, Retinopathie der Frühgeburt und altersbedingter Makuladegeneration.