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d-Allulose, ein funktioneller Bulk-Süßstoff, hat kürzlich aufgrund seiner kalorienarmen Eigenschaften und vielfältigen gesundheitlichen Effekte zunehmende Aufmerksamkeit erregt. d-Allulose wird industriell durch die enzymatische Epimerisierung von d-Fructose hergestellt, die von Ketose 3-Epimerase (KEase) katalysiert wird. In dieser Studie wurde die lebensmitteltaugliche Expression von KEase unter Verwendung von Bacillus subtilis als Wirt untersucht. Clostridium sp. d-Allulose 3-Epimerase (Clsp-DAEase) wurde aus neun d-Allulose-produzierenden KEasen selektiert, die ein besseres Potenzial für die Expression in B. subtilis WB600 zeigten. Die promotorbasierte transkriptionale Regulation und die N-terminal kodierende Sequenz (NCS)-basierte translationale Regulation wurden untersucht, um das DAEase-Expressionsniveau zu steigern. Darüber hinaus wurde der synergistische Effekt von Promotor und NCS auf die Clsp-DAEase-Expression untersucht. Schließlich wurde der Stamm mit der Kombination aus einem PHapII-Promotor und glnA-Up NCS als der beste Clsp-DAEase-produzierende Stamm ausgewählt. Er produzierte effizient Clsp-DAEase mit einer Gesamtaktivität von 333,2 und 1860,6 U/mL durch Schüttelkolben- und Sammeltank-Kulturen.
Zhang et al. (Tue,) haben diese Frage untersucht.