Abstract 3035: Die Lücke schließen: Die Rollen von ETS-Koaktivator-Interaktionen bei der Förderung von Prostatakrebs erforschen

Abstract Die ETS-Familie der Transkriptionsfaktoren umfasst 28 Mitglieder, die alle ein gemeinsames C-terminale DNA-Bindungsdomäne besitzen. ETS spielen wesentliche Rollen in Entwicklungsprozessen, wie der Erhaltung von Stammzellen, der Bildung von Blutgefäßen und dem Zellschicksal. Während sie im normalen Prostatagewebe abwesend sind, werden vier Mitglieder der ETS-Familie in Prostatatumoren exprimiert: ETV1, ETV4, ETV5 und ERG. Unser Labor hat diese Proteine zuvor als oncogene ETS klassifiziert, weil sie die Zellmigration in normalen Prostatastammzellen (RWPE1) fördern können. Transkriptionsfaktoren müssen möglicherweise mit zusätzlichen Proteinen interagieren, um onkogene Rollen zu übernehmen. Meine Forschung untersucht die Interaktionen zwischen 1) ETV1 und EWS sowie 2) ERG und p53. Unser Labor hat festgestellt, dass ETV1, ETV4 und ETV5 wesentliche Interaktionen mit EWS bilden, einem transkriptionellen Koaktivator, der die ETS-Aktivität fördert. In Prostatatumoren führen chromosomale Umstellungen zu N-terminalen Trunkierungen von ETV1, ETV4 und ETV5. Ich stelle die Hypothese auf, dass die EWS-Interaktionsdomäne erhalten bleibt und dass diese trunkierte ETVs onkogen bleiben. Pulldown-Assays mit gereinigtem Voll- und getrunktem ETV1 deuten darauf hin, dass EWS sowohl mit den N-terminalen als auch mit den C-terminalen Portionen von ETV1 interagiert. Ich versuche, trunkierte ETV1, ETV4 und ETV5 in RWPE1-Zellen zu exprimieren. Nach stabiler Expression werde ich ihre Interaktionen mit EWS und ihre Fähigkeit zur Förderung der Migration in vitro bewerten. Um mögliche Proteine zu identifizieren, die EWS mit ETV1 verbinden, wird die Immunpräzipitation-Massenspektrometrie eingesetzt. Mutationen im p53, einem Tumorsuppressorprotein, fördern die Onkogenese und treten in fast der Hälfte aller Krebsfälle auf. Wir hypothetisieren, dass mutiertes p53 mit ETS interagiert, um dessen Rekrutierung an neue genomische Stellen zu fördern. Frühere Studien zeigen, dass mutiertes p53 mit ETS2 mit höherer Affinität bindet als Wildtyp p53, und wir haben diese Liste interagierender ETS um ERG erweitert. Wir möchten untersuchen, ob ERG und mutiertes p53 kooperieren, um onkogene Phänotypen zu fördern. Ich habe erfolgreich Wildtyp p53, mutiertes p53 (R248W) und doppelmutiertes p53 (R248W, T81A) in ein retrovirales Rückgrat kloniert. Ich habe dann RWPE1-Vector- und RWPE1-ERG-exprimierende Zellen transfiziert, um diese Konstrukte zu exprimieren. Obwohl weitere Replikate erforderlich sind, scheint mutiertes p53 die Kolonieformierung in beiden Zelltypen im Vergleich zu Wildtyp p53 zu fördern. Ich plane, diese Beobachtungen zu validieren und eine geeignete negative Kontrollzelllinie zu erstellen, bevor ich in ein Mausmodell übergehe. Durch die Fortsetzung dieser Arbeit werde ich kritische Einblicke in die molekularen Mechanismen geben, durch die eine Untergruppe von ETS-Faktoren onkogene Funktionen erreichen kann. Wir betrachten die Beiträge der DNA-Bindungsspezifität und der Koaktivatorinteraktionen bei der Förderung der mit Prostatakrebs verbundenen Phänotypen. Zitationsformat: Kaitlyn M. Mills, Nicholas Downing, Stephanie Metcalf, Peter Hollenhorst. Die Lücke schließen: Die Rollen von ETS-Koaktivator-Interaktionen bei der Förderung von Prostatakrebs - Abstract. In: Proceedings of the American Association for Cancer Research Annual Meeting 2024; Teil 1 (Reguläre Abstracts); 2024 Apr 5-10; San Diego, CA. Philadelphia (PA): AACR; Cancer Res 2024;84 (6Suppl): Abstract Nr. 3035.