Duale T-Zell konstante β-Kette (TRBC)1 und TRBC2 Färbung zur Identifizierung von T-Zell-Neoplasien mittels Durchflusszytometrie

Zusammenfassung Die Diagnose leukämischer T-Zell-Malignome ist oft herausfordernd, aufgrund von überlappenden Merkmalen mit reaktiven T-Zellen und den Einschränkungen der derzeit verfügbaren T-Zell-Klonalitätsassays. Neu entwickelte therapeutische Antikörper, die spezifisch für die sich gegenseitig ausschließenden T-Zell-Rezeptor konstante β-Ketten (TRBC)1 und TRBC2 Isoformen sind, bieten eine einzigartige Gelegenheit, die TRBC-Einschränkung als Surrogat für Klonalität in der durchflusszytometrischen Analyse von T-Zell-Neoplasien zu bewerten. Um den diagnostischen Nutzen dieses Ansatzes zu demonstrieren, untersuchten wir 164 klinische Proben mit (60) oder ohne (104) T-Zell-Neoplasie sowie 39 Blutmuster von gesunden Spendern. Die duale TRBC1- und TRBC2-Expression wurde innerhalb eines umfassenden T-Zell-Panels untersucht, ähnlich der routinemäßigen Bewertung von Kappa- und Lambda-Immunoglobulin-Leichtketten zur Detektion klonaler B-Zellen. Polytypische TRBC-Expression wurde bei totalen, CD4+ und CD8+ T-Zellen aller gesunden Spender nachgewiesen; und durch intrazelluläre Färbung an benignen T-Zell-Vorläufern. Alle neoplastischen T-Zellen waren TRBC-restriktiv, mit Ausnahme von 8 Fällen (13%), die keine TRBC-Expression aufwiesen. T-Zell-Klone ungewisser Signifikanz wurden in 17 Proben ohne T-Zell-Malignität (13%) identifiziert und machten kleinere Subsets als neoplastische Klone aus (Median: 4,7 vs. 69% der Lymphozyten, p < 0,0001). Einzelne Färbung für TRBC1 erzeugte spurious TRBC1-dim Subsets in 24 klinischen Proben (15%), die alle mit dualer TRBC1/2-Färbung gelöst wurden. Die Bewertung der TRBC-Einschränkung mittels Durchflusszytometrie bietet eine schnelle diagnostische Methode zur Identifizierung klonaler T-Zellen und zur genauen Bestimmung der zielbaren TRBC-Isoform, die von T-Zell-Malignitäten exprimiert wird.