Beteiligung des Superoxidanionradikals an der Autoxidation von Pyrogallol und ein praktischer Test für Superoxiddismutase

Die Autoxidation von Pyrogallol wurde in Gegenwart von EDTA im pH-Bereich von 7,9–10,6 untersucht. Die Rate der Autoxidation steigt mit steigendem pH. Bei pH 7,9 wird die Reaktion durch Superoxiddismutase zu 99 % gehemmt, was auf eine nahezu vollständige Abhängigkeit von der Teilnahme des Superoxidanionradikals, O 2 · − , in der Reaktion hinweist. Bis pH 9,1 wird die Reaktion immer noch zu über 90 % durch Superoxiddismutase gehemmt, aber bei höherer Alkalität werden O 2 · − ‐unabhängige Mechanismen schnell dominant. Katalase hat keinen Einfluss auf die Autoxidation, reduziert jedoch den Sauerstoffverbrauch um die Hälfte, was zeigt, dass H 2 O 2 das stabile Produkt des Sauerstoffs ist und dass H 2 O 2 nicht am Autoxidationsmechanismus beteiligt ist. Eine einfache und schnelle Methode zur Bestimmung von Superoxiddismutase wird beschrieben, die auf der Fähigkeit des Enzyms basiert, die Autoxidation von Pyrogallol zu hemmen. Eine plausible Erklärung wird für den nicht‐kompetitiven Teil der Hemmung der Catechol O ‐Methyltransferase gegeben, die durch Pyrogallol hervorgerufen wird.