Wachstum von Mycobacterium lepraemurium in Kulturen von Maus-Peritoneal-Makrophagen

Erfolgreiches Wachstum von Mycobacterium lepraemurium wurde in Kulturen von Maus-Peritoneal-Makrophagen beobachtet. Das optimale Medium zur Erhaltung der Wirtszellen bestand aus 40% Pferdeserum, 50% des chemisch definierten Mediums NCTC 109 und 10% einer 1:5-Dilution von Rinderenbryoextrakt, ergänzt mit Leberextrakt und Eisennitrat. Die Vermehrung der Bazillen wurde nach 1 Woche beobachtet und das maximale Wachstum nach 6 bis 7 Wochen. Alle Makrophagen waren mit Dutzenden bis Hunderten der Organismen gefüllt in Kulturen mit maximalem Wachstum. Glycerin verursachte eine Zunahme der normalen Länge von M. lepraemurium, ohne dass eine entsprechende Zunahme der Anzahl der Bazillen beobachtet wurde. Eine Verlängerung von M. lepraemurium wurde 3 oder 4 Tage nach der Infektion beobachtet. Schnelles und gleichmäßiges Wachstum von M. lepraemurium wurde in seriell übertragenen Kulturen (Subkulturen) erreicht. Der kumulative Anstieg der Anzahl der intrazellulären Bazillen betrug 1,4 x 10(20)-fach in 14 Übertragungen über einen Zeitraum von 68 Wochen in einer Serie und 10(17)-fach in 12 Übertragungen über einen Zeitraum von 56 Wochen in einer anderen Serie. Die Generationszeit von M. lepraemurium betrug 7 Tage, eine Wachstumsrate, die das schnellste Wachstum der Organismen in vivo annähert. Organismen, die aus Kulturen in verschiedenen Wachstumsphasen geerntet wurden, verursachten maulbrüchige Lepra bei Mäusen, zeigten jedoch kein Wachstum in bakteriologischen Medien. Das vorliegende Modell bietet die Möglichkeit für Studien zur Wirts-Parasit-Beziehung, ohne die Komplikation des extracellulären Wachstums der Parasiten.