Über die Bispezifität hinaus: Kontrollierter Fab-Arm-Austausch zur Herstellung von Antikörpern mit mehreren Spezifitäten

Kontrollierter Fab-Arm-Austausch (cFAE) hat sich als eine generische und vielseitige Technologie zur effizienten Herstellung von IgG-ähnlichen bispezifischen Antikörpern (DuoBodies oder DBs) erwiesen, von denen sich mehrere in klinischer Entwicklung befinden und ein Produkt, Amivantamab, von der Food and Drug Administration genehmigt wurde. In dieser Studie erweitern wir die cFAE-Werkzeugkiste, indem wir VHH-Module an den C-termini der DB-IgGs integrieren, die als DB-VHHs bezeichnet werden. Dieser Ansatz ermöglicht die kombinatorische Herstellung von tri- und tetraspzifischen Molekülen mit flexiblen Valenzen auf eine einfache Weise. Mithilfe von cFAE wurde eine Vielzahl von multispezifischen Molekülen hergestellt und auf Herstellbarkeit sowie physikochemische Eigenschaften untersucht. Darüber hinaus konnten wir DB-VHHs erzeugen, die effizient die von natürlichen Killerzellen vermittelte Lysis von Tumorzellen auslösten, was die Nützlichkeit dieses Formats für potenzielle therapeutische Anwendungen demonstriert.