Ein Inhibitor der Tat/TAR-RNA-Interaktion, der effektiv die HIV-1-Replikation unterdrückt

Einer der ersten Schritte in der HIV-Genexpression ist die Rekrutierung des Tat-Proteins zur Transkriptionsmaschinerie nach dessen Bindung an das RNA-Response-Element TAR. Aus einem Pool von 3,2 x 10(6) einzelnen chemischen Entitäten konnten wir ein hybrides Peptoid/Peptid-Oligomer von 9 Resten (CGP64222) auswählen, das in der Lage war, die Bildung des Tat/TAR-RNA-Komplexes in vitro bei nanomolaren Konzentrationen zu blockieren. NMR-Studien zeigten, dass die Verbindung ähnlich an Polypeptide bindet, die vom Tat-Protein abgeleitet sind, und eine konformationale Veränderung im TAR-RNA-Bindungsbereich induziert. Darüber hinaus hemmte 10-30 µM CGP64222 spezifisch die Tat-Aktivität in einem zellulären Tat-abhängigen Transaktivierungsassay zur Fusions-induzierten Genstimulation (FIGS) und blockierte die HIV-1-Replikation in primären menschlichen Lymphozyten. Im Gegensatz dazu hemmen Peptide ähnlicher Größe und Seitenwechselzusammensetzung die Zellfusion im FIGS-Assay und hemmen nur teilweise die HIV-1-Replikation in primären menschlichen Lymphozyten. Somit haben wir eine Verbindung, CGP64222, entdeckt, die spezifisch die Tat/TAR-RNA-Interaktion in vitro und in vivo hemmt.