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Pseudotyp-Neutralisationstests sind leistungsstarke Werkzeuge zur Untersuchung funktioneller Antikörperantworten gegen Viren in Labors mit niedriger Biosicherheit. Die in der Literatur beschriebenen Protokolle unterscheiden sich jedoch stark hinsichtlich Material, Reagenzien und Methoden, die zur Durchführung dieser Tests und zur Analyse der erzeugten Rohdaten verwendet werden. Dies könnte zu Diskrepanzen zwischen den Ergebnissen verschiedener Labore führen, selbst wenn dieselben Pseudotypen und dieselben Proben analysiert werden. Hier beschreiben wir im Detail ein experimentelles Protokoll zur Durchführung von Pseudotyp-Neutralisationstests unter Verwendung lentiviraler Pseudotypen, die Influenza-Hämagglutinin tragen und Feuerfliegen-Luciferase exprimieren. Wir präsentieren auch die Schritte, die notwendig sind, um die Daten zu analysieren und die halbmaximale Hemmkonzentration der analysierten Seren zu berechnen. Dieses Protokoll wird die Validierung und Standardisierung des Pseudotyp-Neutralisationstests für die Serologie des Influenza-Virus unterstützen. Darüber hinaus wird es einen Ausgangspunkt für die Entwicklung von Pseudotyp-Neutralisationstests bieten, die Pseudotypen mit anderen viralen Hüllproteinen verwenden.
Ferrara et al. (Mon.) haben diese Frage untersucht.