Schnelle und präzise Quantifizierung von HIV-1-RNA im Plasma mittels eines branched DNA Signalverstärkungsassays

Der Spiegel von menschlicher Immunschwächevirus Typ 1 (HIV-1) RNA im menschlichen Plasma wurde direkt mit Hilfe eines Festphasen-Nukleinsäure-Hybridiationsassays quantifiziert, der auf der branched DNA (bDNA) Signalverstärkungstechnologie mit chemilumineszenter Detektion basiert. Die Signalverstärkung erfolgt durch die Einbeziehung von Stellen für 1.755 alkalische Phosphatase-markierte Sonden pro Genom von HIV-1, nach aufeinanderfolgender Hybridiation von ziel-spezifischen Oligonukleotiden und bDNA-Verstärker-Molekülen. Der Assay wird in Mikrowell-Platten durchgeführt, ähnlich einem Immunoassay, und ist für den routinemäßigen Laboreinsatz geeignet. Reproduzierbarkeits- und Spezifitätsstudien zeigten, dass die bDNA-Methode präzise war und keine Reaktivität mit seronegativen Spendern zeigte. HIV-1 RNA-Spiegel wurden für 348 seropositive Proben quantifiziert, mit einer Nachweisrate von 83% für Proben von Patienten mit < 500 CD4+ T-Zellzahlen. Es wurde festgestellt, dass sich die Plasmarna-Spiegel mit dem Krankheitsstadium ändern und als Reaktion auf die antivirale Therapie. Die Quantifizierung von HIV-1 RNA im Plasma von HIV-1-infizierten Patienten unter Verwendung des bDNA-Tests kann eine nützliche Methode zur Überwachung des Fortschreitens der HIV-1-Krankheit und der therapeutischen Reaktion sein.