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Ein zellfreies System wurde entwickelt, das die korrekte Integration von einzelnen und mehrspanningen Membranproteinen von Escherichia coli in Proteoliposome ermöglicht. Wir fanden, dass physiologische Konzentrationen von Diacylglycerol erforderlich waren, um eine spontane Integration in Liposome auch von der polytopischen Mannitol-Permease zu verhindern. Durch die Verwendung von diacylglycerolhaltigen Proteoliposomen identifizierten wir einen neuartigen Integrationsstimulationsfaktor. Die Integration der Mannitol-Permease war sowohl vom SecYEG-Translokon als auch von diesem Faktor abhängig und wurde durch Signalerkennungspartikel und deren Rezeptor vermittelt. Die Integration des M13-Procoats, die sowohl von Signalerkennungs-partikel/ Rezeptor als auch von SecYEG unabhängig ist, wurde ebenfalls durch diesen Faktor gefördert. Darüber hinaus stimulierte der Faktor die posttranslationalen Translokation von präsekretorischen Proteinen, was darauf hindeutet, dass er auch die Integration einer Signalsequenz vermittelt. Dieser Faktor wurde als ein membranständiger Bestandteil, der von Lipid A abgeleitet ist und eine peptidähnliche Struktur aufweist, identifiziert.
Nishiyama et al. (Fr,) haben diese Frage untersucht.