Erythropoietin kann die Expression von Bcl-xL durch Stat5 in erythropoietin-abhängigen Vorläuferzelllinien induzieren

Erythropoietin (Epo) initiiert seine zelluläre Antwort, indem es an den Epo-Rezeptor bindet, was die Aktivierung des Signalübertragungs- und Transkriptionsaktivatorproteins (Stat) 5 auslöst. Zellkulturstudien an erythroiden Vorläuferzellen haben gezeigt, dass Epo als Überlebensfaktor wirkt, indem es Apoptose zumindest teilweise durch Bcl-x(L), ein anti-apoptotisches Protein der Bcl-2-Familie, unterdrückt. In diesem Bericht untersuchen wir, ob Stat5 die Transaktivierung des bcl-x-Gens als Antwort auf Epo induzieren kann. Zwei Epo-reaktive Vorläuferzelllinien, HCD-57 und Bcl-2-transfizierte Ba/F3-Epo-Rezeptoren (Ba/F3-EpoR-Bcl-2), wurden in dieser Studie verwendet. Nach Epo-Stimulation beobachteten wir eine Korrelation zwischen der Expression von bcl-x(L) und der Aktivierung von Stat5, bewertet durch die Expression von Oncostatin M, einem direkten Ziel von Stat5, sowie die Phosphorylierung und nukleare Translokation von Stat5. Darüber hinaus wurde ein Stat-Bindeelement im bcl-x-Promotor gefunden, das als Antwort auf Epo aktiv war, eine Erkenntnis, die weiter bestätigt wurde, da die Mutagenese dieses Sequenzmotivs seine Promotoraktivität aufhob und die Überexpression eines dominierenden negativen Stat5-Proteins die Transaktivierung blockierte. Bei durchgeführten DNA-Protein-Bindungsanalysen fanden wir, dass Stat5, nicht Stat1 oder Stat3, das Protein war, das als Antwort auf Epo an den bcl-x-Promotor gebunden war. Diese Daten deuten darauf hin, dass die Epo-abhängige Aktivierung von Stat5 einen transkriptionellen Weg darstellt, den Epo-reaktive Vorläuferzellen nutzen können, um die Expression von bcl-x(L) zu induzieren und folglich Apoptose zu hemmen.