Die Abschwächung des Venezolanischen Pferdeenzephalitisvirus-Stamms TC-83 wird durch die 5'-nichtcodierende Region und das E2-Hüllenglykoprotein kodiert

Der virulente Trinidad-Esel (TRD)-Stamm des Venezolanischen Pferdeenzephalitisvirus (VEE) und sein lebend abgeschwächter Impfstoffabkömmling, das TC-83-Virus, weisen unterschiedliche neurovirulente Eigenschaften auf. Ein vollwertiger cDNA-Klon des TC-83-Virusgenoms wurde hinter dem Bakteriophage T7-Promoter im Polylinker des Plasmids pUC18 konstruiert. Um die genomischen Determinanten der Abschwächung des TC-83-Virus zu identifizieren, wurden TRD-Virus-spezifische Sequenzen durch in vitro-Mutagenese oder Rekombination in den TC-83-Virusklon eingeführt. Die antigenanalytische Untersuchung von rekombinanten Viren mit VEE E2- und E1-spezifischen monoklonalen Antikörpern ergab vorhergesagte antigenische Reaktionen. Maus-Herausforderungsversuche zeigten, dass die genetischen Marker, die für den abgeschwächten Phänotyp des TC-83-Virus verantwortlich sind, aus der Nukleotidposition 3 im 5'-nichtcodierenden Bereich und dem E2-Hüllenglykoprotein bestehen. Die Aminosäureposition E2-120 des TC-83-Virus schien der wichtigste strukturelle Determinant der Abschwächung zu sein. Das Einfügen der TRD-Virus-spezifischen 5'-nichtcodierenden Region allein in den Vollgenklon des TC-83-Virus änderte den abgeschwächten Phänotyp des Virus nicht. Allerdings verstärkte die TRD-Virus-spezifische 5'-nichtcodierende Region das Virulenzpotential der nachgeschalteten Aminosäuresequenzen des TRD-Virus.