Expression des menschlichen Scavenger-Rezeptors der Klasse B Typ I in kultivierten menschlichen monocytenabgeleiteten Makrophagen und atherosklerotischen Läsionen

Der Scavenger-Rezeptor der Klasse B Typ I (SR-BI) und sein menschliches Homolog CLA-1 (CD36 und LIMPII-Analog-1) wurden kürzlich als Bindungspartner von HDL identifiziert und vermitteln die selektive Aufnahme von HDL-Lipiden. Die Gewebeatmung sowohl von murinen als auch menschlichen Rezeptoren ist recht ähnlich, da sie in der Leber und in steroidogenen Geweben reichlich exprimiert werden. Die Expression und Funktion des menschlichen SR-BI (hSR-BI) im peripheren Bereich des umgekehrten Cholesterintransports, wie z.B. in Makrophagen, sind jedoch noch unklar. In der vorliegenden Studie haben wir zwei verschiedene Arten von anti-hSR-BI-Polypeptid-Antikörpern (Abs) erzeugt: einen gegen die extrazelluläre Domäne und den anderen gegen die intrazelluläre Domäne. Wir haben die Expression von hSR-BI-mRNA und immunreaktiver Masse in frisch isolierten kultivierten menschlichen monocytenabgeleiteten Makrophagen (hMphi) und in atherosklerotischen Läsionen untersucht. Im Gegensatz zum früheren Bericht wurde hSR-BI-mRNA in kultivierten hMphi exprimiert und markant hochreguliert mit der Differenzierung, bestimmt durch Northern-Blot- und reverse Transkriptase-basierte Polymerase-Kettenreaktionsanalysen. Das mRNA-Expressionmuster während der Differenzierung von hMphi war dem von SR-Klasse A und einem anderen Mitglied der SR-Klasse B, CD36, sehr ähnlich. Die Proteinexpression wurde durch Western-Blot-Analysen mit den oben genannten Abs bestätigt, die ein Hauptband von 83 kDa zeigten. Modifizierte Lipoproteine wie oxidiertes LDL und acetyliertes LDL induzierten eine 5-fache Erhöhung der mRNA- und Proteinexpression von hSR-BI. Die konfokale Immunfluoreszenzmikroskopie zeigte, dass die immunreaktive Masse von hSR-BI als heterogenes, punktuelles Färbemuster nachweisbar war. Darüber hinaus ergab die immunhistochemische Analyse, dass die immunreaktive Masse von hSR-BI in Schaumzellen in menschlichen aortalen atherosklerotischen Läsionen nachgewiesen wurde und dass es keinen signifikanten Unterschied in den Färbemustern zwischen den beiden Abs gab. Diese Studie zeigt deutlich, dass hSR-BI in den lipidhaltigen Makrophagen in menschlichen atherosklerotischen Läsionen exprimiert wird, was darauf hindeutet, dass es sehr wichtig ist, seine Funktion und Regulation in hMphi zu kennen, um die biologische Nützlichkeit dieses Moleküls zu verstehen.