Schützende Wirkung von hochdichten Lipoproteinen assoziierter Paraoxonase. Hemmung der biologischen Aktivität von minimal oxidiertem niedrigdichtem Lipoprotein.

Unsere Gruppe hat zuvor gezeigt, dass oxidierte Phospholipide in leicht oxidiertem LDL (MM-LDL), das durch Oxidation mit Lipoxygenase, Eisen oder Ko-Kulturen von Arterienwandzellen erzeugt wurde, die Monozyt-Endothel-Interaktionen erhöhen und diese Folge von Ereignissen durch HDL blockiert wird. Um weitere Einblicke in den Mechanismus zu erhalten, durch den HDL die Aktivität von MM-LDL aufhebt, haben wir den Effekt der HDL-assoziierten Ester-Hydrolase Paraoxonase (PON) untersucht. Die Behandlung von MM-LDL mit gereinigtem PON reduzierte signifikant die Fähigkeit von MM-LDL, Monozyt-Endothel-Interaktionen zu induzieren. Die Inaktivierung von PON durch vorherige Behandlung von HDL mit Wärme oder EDTA verringerte die Fähigkeit von HDL, die LDL-Modifikation zu hemmen. Die HPLC-Analyse von Phospholipiden, die vor und nach der Behandlung mit gereinigtem PON aus MM-LDL isoliert wurden, zeigte, dass die Absorption von Phospholipiden bei 270 nm verringert wurde, während bei 235 nm kein Effekt beobachtet wurde. Oxidiertes 1-Palmitoyl-2-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphorylcholin (Ox-PAPC) und spezifische Fraktionen von Ox-PAPC, die durch HPLC isoliert wurden, induzierten die gleichen Monozyt-Endothel-Interaktionen wie MM-LDL. Biologisch aktive und inaktive HPLC-Fraktionen von Ox-PAPC wurden durch Massenspektrometrie mit schneller Atombombardierung verglichen, die zeigte, dass aktive Fraktionen Ionen mit einem Mass-to-Charge-Verhältnis besaßen, das größer war als das von native PAPC um Vielfache von 16 D, was auf die Addition von 3 und 4 Sauerstoffatomen zu PAPC hindeutet. Der Vergleich von Ox-PAPC durch Massenspektrometrie mit schneller Atombombardierung vor und nach der PON-Behandlung zeigte, dass PON diese multioxyginierten Moleküle zerstörte, die in biologisch aktiven Fraktionen von Ox-PAPC gefunden wurden. Diese Ergebnisse deuten darauf hin, dass PON in HDL möglicherweise vor der Induktion von Entzündungsreaktionen in Arterienwandzellen schützt, indem es biologisch aktive Lipide in leicht oxidiertem LDL zerstört.