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Die Offline-Kopplung eines isoelectric Trapping-Geräts, das als membrane separated wells for isoelectric focusing and trapping (MSWIFT) bezeichnet wird, an massenspektrometriebasierte proteomische Studien wird beschrieben. MSWIFT ist ein hochoffizientes, hochdurchsatzfähiges, massenspektrometriekompatibles isoelectric Trapping-Gerät, das isoelectric Point (pI)-basierte Trennungen komplexer Peptidmischungen ermöglicht. In MSWIFT werden Trennung und Fang der Analyten erreicht, indem die Peptidionen durch Membranen mit festgelegten pH-Werten migriert werden, bis der pI des Peptids durch die pH-Werte benachbarter Membranen eingegrenzt wird. Die pH-Werte der Membranen können angepasst werden, was ein hohes Maß an experimenteller Flexibilität ermöglicht. Zu den spezifischen Vorteilen der Verwendung von MSWIFT zur Vorfraktionierung von Proben gehören: (1) kleine Probenvolumina (ungefähr 200 Mikroliter), (2) maßgeschneiderte Membranen über einen großen pH-Bereich, (3) Flexibilität in der Anzahl der gewünschten Fraktionen, (4) Membranverträglichkeit mit einer Vielzahl von Lösungssystemen und (5) die resultierenden Fraktionen erfordern keine Probenaufbereitung vor der MS-Analyse. Hier demonstrieren wir die Nützlichkeit von MSWIFT für die massenspektrometriebasierte Detektion von Peptiden zur Verbesserung des dynamischen Bereichs und zur Reduzierung von Ioneneffekten bei hochdurchsatzfähigen Trennungen von tryptischen Peptiden.
Cologna et al. (Mon,) haben diese Frage untersucht.