Mehrere Sequenzelemente einer einzelnen funktionalen Klasse sind erforderlich für die Reaktionsfähigkeit des Maus c-fos Promoters auf zykliches AMP.

Substanzen, die die intrazelluläre Konzentration von zyklichem AMP (cAMP) erhöhen, induzieren schnell und vorübergehend die Expression des c-fos Proto-Onkogens in BALB/c 3T3-Zellen. Wir zeigen, dass die Enhancer-Region des Maus c-fos Promoters mehrere Elemente enthält, die zur cAMP-Reaktionsfähigkeit des Promoters in transienten Expressionsassays beitragen. Das potenteste Element wurde als ein zuvor kartiertes basales Promoterelement und Proteinbindungsstelle identifiziert, das 65 Basenpaare stromaufwärts der transkriptionalen Initiationsstelle liegt. Dieses Element und zwei weniger potente Stellen enthielten eine Übereinstimmung mit der Kernsequenz des cAMP-Reaktionselements (CRE), die in mehreren Säugetiergenen definiert wurde. Die relativen Potenzen dieser Elemente stimmten mit ihren relativen Affinitäten für zelluläre Faktoren überein, die in vitro an das CRE binden. Die Mutation aller drei Elemente konnte die cAMP-Reaktionsfähigkeit des c-fos Promoters im transienten Expressionsassay nicht vollständig aufheben. Wir präsentieren jedoch Beweise, dass diese verbleibende Reaktionsfähigkeit auf Sequenzen in der Vektor-DNA zurückzuführen sein könnte. Schließlich zeigen wir, dass ein doppelsträngiges Oligonukleotid, das das Haupt-c-fos-CRE trägt, ausreicht, um die Induktion des endogenen c-fos Gens durch cAMP zu blockieren. Daher erfordert die Induktion des endogenen Gens positiv wirkende zelluläre Faktoren, die mit einer einzigen funktionalen Klasse regulatorischer Stellen im c-fos Gen interagieren. Unabhängige regulatorische Elemente, wie das Serumreaktionselement und vermeintliche AP-2-Stellen, sind alleine nicht ausreichend, um die cAMP-Reaktion zu vermitteln.