Antigen-spezifische Identifizierung und Klonierung von Hybridomen mit einem fluoreszenzaktivierten Zellsortierer.

Myelom-Spleen-Zellhybride (Hybridome), die Antikörper gegen Maus-Immunoglobulin-Allelotypen produzieren, wurden mit fluoreszierenden Mikrokügelchen, die mit Myelom-Protein-Antigenen gekoppelt sind, markiert. Das Verhältnis von spezifischer zu unspezifischer Mikrokügelchenbindung durch lebensfähige Hybridomzellen betrug etwa 100:1. Durch die Verwendung eines modifizierten fluoreszenzaktivierten Zellsortierers (FACS) wurden ausgewählte Hybridomzellen in einer Mischung einzeln in Medien in Mikrokulturmulden sortiert, wo sie mit Thymozyten-Feederzellen zu Klonen heranwuchsen, die einen gewünschten monoklonalen Antikörper produzierten. Lebensfähige Zellen wurden durch Messung ihrer Lichtstreuung und Autofluoreszenz-Eigenschaften ausgewählt. Seltene, Antikörper-produzierende Klone wurden ohne aufwändiges Screening und wiederholtes Subkultivieren erhalten. Diese Technik sollte die Bandbreite der monoklonalen Antikörper, die leicht aus Hybridomen gewonnen werden können, erweitern und den Prozess der Beschaffung gewünschter Hybridome erheblich erleichtern.