Der Prp19p-assoziierte Komplex in der Aktivierung des Spliceosoms

Während der Aktivierung des Spliceosoms tritt eine große strukturelle Umstellung auf, die die Freisetzung von zwei kleinen nukleären RNAs, U1 und U4, und die Addition eines mit Prp19p assoziierten Proteinkomplexes umfasst. Wir zeigen hier, dass der mit Prp19p assoziierte Komplex erforderlich ist für die stabile Assoziation von U5 und U6 mit dem Spliceosom, nachdem U4 dissociiert ist. Ultraviolet-Crosslinking-Analysen ergaben die Existenz von zwei Basenpaarungsmodi zwischen U6 und der 5'-Spleißstelle, sowie einen Wechsel dieser Basenpaarung von einem zum anderen, der den mit Prp19p assoziierten Komplex während der Aktivierung des Spliceosoms erforderte. Darüber hinaus wurde eine Prp19p-abhängige strukturelle Veränderung in U6 kleinen nukleären Ribonukleoprotein-Partikeln nachgewiesen, die die Destabilisierung von Sm-ähnlichen (Lsm) Proteinen umfasst, um Wechselwirkungen zwischen der Lsm-Bindungsstelle von U6 und der Intronsequenz nahe der 5'-Spleißstelle herzustellen, was auf eine dynamische Assoziation von Lsm mit U6 und eine direkte Rolle der Lsm-Proteine bei der Aktivierung des Spliceosoms hinweist.