Die Mutagenese des 5'-flankierenden Bereichs des Ratteninsulin II definiert Sequenzen, die für die Expression in HIT-Zellen wichtig sind.

Um die cis-aktiven Elemente, die für die Expression des Ratteninsulin II-Gens wichtig sind, zu definieren, analysierten wir die Auswirkungen von 5'-Deletionen und Linker-Scanning-Mutationen auf die Expression eines Ratteninsulin II-Reporter-Gens in einer Insulinom-Zelllinie (HIT). Das Reporter-Gen enthielt 448 Basenpaare des 5'-flankierenden Sequenz, die mit dem bakterielle Chloramphenicol-Acetyltransferase-Gen verbunden waren. Die Expression der 5'-Deletionsmutationen zeigte, dass die minimale Sequenzanforderung für eine effiziente Expression 218 Basenpaare der 5'-flankierenden Sequenz betrug und mindestens drei Regionen stromabwärts von -218 für die Transkription wichtig waren. Eine genauere Lokalisierung dieser Elemente und der cis-aktiven Sequenzen im Promotor wurde durch die Analyse der Expression von 18 Linker-Scanning-Mutationen erreicht. In diesen Studien wurden mindestens vier andere Regionen identifiziert, die für die Expression des Ratteninsulin II-Gens wichtig sind. Diese Befunde legen nahe, dass die Sequenzen, die für die Expression von Ratteninsulin II und Ratteninsulin I wichtig sind, trotz des hohen Maßes an Sequenzsimilarität in ihren 5'-flankierenden Regionen signifikant unterschiedlich sein können.