Eine Einführung in die Probenvorbereitung und Bildgebung durch Kryo-Elektronenmikroskopie für die Strukturbiologie

Die Transmissionselektronenmikroskopie (EM) ist eine vielseitige Technik, die verwendet werden kann, um biologische Proben von intakten eukaryotischen Zellen bis hin zu einzelnen Proteinen >150 kDa zu bilden. Es gibt mehrere Strategien zur Vorbereitung von Proben für die Bildgebung mit EM, einschließlich negativer Färbung und kryogener Gefrierung. In den letzten Jahren hat die Kryo-EM eine 'Auflösungsrevolution' durchlaufen, die sowohl Fortschritte in der Bildgebungshardware, Software zur Bildverarbeitung als auch Verbesserungen bei der Probenvorbereitung zu verdanken ist, was zu einer wachsenden Zahl von Forschern führt, die Kryo-EM als Forschungswerkzeug nutzen. Allerdings ist Kryo-EM immer noch ein schnell wachsendes Feld mit einzigartigen Herausforderungen. Hier fassen wir Überlegungen zur Bildgebung einer Reihe von Proben von makromolekularen Komplexen bis hin zu Zellen unter Verwendung von EM zusammen.